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一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法

来源：云南林业和草原技术推广网时间：2020-08-17 阅读2194 次

专利类型：发明授权

申请(专利)号：CN201811413799.1

申请日：2018-11-26

授权公布号：CN109496849B

授权公告日：2020-07-28

申请人：贵州省亚热带作物研究所

地址：562400 贵州省黔西南布依族苗族自治州兴义市下五屯峰林东路1号

发明人：刘小翠; 范建新; 刘荣; 王代谷; 何凤平

分类号：A01H4/00

主分类号：A01H4/00

国省代码：52

页数：7

代理机构：贵州派腾知识产权代理有限公司

代理人：谷庆红

主权项：

1.一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法,其特征在于,包括以下步骤：(1)外植体的采集：在澳洲坚果成年树生长萌芽期,用消毒过的剪刀截取枝条上健康且无病虫害带芽的茎段为外植体,茎段长5～10cm,直径0.1～0.2cm；(2)外植体预处理：将上述选好的长茎段迅速带回室内,去掉叶片,用消毒过的剪刀剪成3～4cm长段,置于干净的容器中,于自来水下流水冲洗30～60min；(3)消毒：将上述预处理后的茎段置于灭菌过的超净工作台上,采用消毒剂A处理20～40s,然后用消毒剂B处理8～12min,最后用无菌水冲洗3～5次,每次冲洗4～6min；所述消毒剂A为吐温20按照2滴/500mL的量加入到酒精中混合而成；所述消毒剂B为吐温20按照2滴/500mL的量加入到浓度为0.05～0.15％的升汞中混合而成；(4)接种：用灭菌手术剪将上述消毒过的长茎段两端各剪掉0.4～0.6cm,然后将剩余的长茎段切成长度为0.8～1.2cm的带腋芽茎段,接种到培养基；(5)培养：将上述接种后的培养基放置在无菌培养室中进行恒温暗培养,培养温度为25～28℃,湿度65～75％；所述培养基为MS+0.5～2.0mg/L6-BA,+0.1～1.0mg/LNAA,+25～35g/L蔗糖、+5～10g/L琼脂,混合后的培养基pH调节至5.8～6.0。

摘要：

本发明属于澳洲坚果栽培技术领域,尤其是一种促进澳洲坚果茎段诱导愈伤组织的方法,通过外植体的采集、外植体预处理、消毒、接种、培养共五个步骤,通过本发明方案处理,使得外植体污染率为5％以下,愈伤组织诱导率达到96％以上,能够在短期内获得愈伤组织和再生芽,愈伤组织可以作为无菌芽的诱导材料,不需要进行消毒处理,再生芽生长较快,不容易出现细胞组织坏死情况。

查看法律状态

法律状态公告日	法律状态	法律状态信息
2019-03-22	公开	公开
2020-01-17	实质审查的生效	实质审查的生效 IPC(主分类):A01H4/00
2020-07-28	授权	授权

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